صبغ الجراثيم البكتيرية الداخلية Endospore staining

الجراثيم الداخلية Endospores مقاومة بطبيعتها لتقبل الأصباغ, لذا لايمكن صبغها بالطرق العادية للصبغ مثل جراثيم بكتريا الكلوستريديوم و يجب تعريضها للحراره العالية للسماح للصبغ بالتغلغل داخلها و يسخدم لذلك حمام مائي أو التعريض لحرارة اللهب .

طريقة العمل:

1-يحضر غشاء بكتيري من مزرعة بكتيرية عمرها 48 ساعة ثم يثبت الغشاء.

2-يغمر الغشاء بضبغة أخضر الملاكيت وتسخن الشريحة بتعريض سطحها السفلي للهواء الساخن فوق اللهب لمدة من 4-5 دقائق مع مراعاة عدم غليان الصبغة وعدم جفافها.

3-بعد ان تبرد الشريحة تغسل تحت تيار ماء خفيف.

4-يصبغ الغشاء بصبغة السفرانين لمدة دقيقة.

5-يغسل الغشاء تحت تيار ماء خفيف ثم تترك الشريحة لتجف ثم يفحص التحضير تحت المجهر باستعمال قوة 10 ثم العدسة الزيتية (قوة 100) وزيت السيدر و تبدو الجراثيم الداخلية خضراء اللون في حين أن الخلايا الخضرية المتصلة بالجرثومة تكون حمراء اللون.

شاهد عرض تعليمي حول صبغ الجراثيم

http://www.microbelibrary.org/microbelibrary/files/ccImages/Articleimages/mayberry/SporeStain_files/frame.htm